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细胞凋亡检测

凋亡，或称程序性细胞死亡，是维持细胞稳态和预防癌症等疾病发展的重要过程。理(lǐ)解和测量凋亡对于癌症生物(wù)學(xué)、药物(wù)开发和毒理(lǐ)學(xué)等多(duō)个研究领域至关重要。细胞凋亡测定服務(wù)提供了精(jīng)确可(kě)靠的方法来通过两种关键途径检测凋亡：Annexin V染色和Caspase 3/7测定。

 

Annexin V染色

Annexin V染色是检测细胞凋亡早期阶段最广泛使用(yòng)的方法之一。这种测定法利用(yòng)的是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内层转移到外层的过程，这是细胞凋亡的一个早期标志(zhì)。

工(gōng)作(zuò)原理(lǐ)：

原理(lǐ)：在健康的细胞中(zhōng)，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜的细胞质(zhì)侧。在早期凋亡过程中(zhōng)，PS翻转到细胞膜的外表面，在那里它变得可(kě)以被Annexin V识别，Annexin V是一种对PS具(jù)有(yǒu)高亲和力的蛋白质(zhì)。使用(yòng)流式细胞仪可(kě)以检测到Annexin V与PS的结合，从而识别凋亡细胞。

双重染色：為(wèi)了區(qū)分(fēn)凋亡细胞和坏死细胞，通常会将丙啶碘化物(wù)（PI）与Annexin V一起使用(yòng)。PI只能(néng)穿透膜受损的细胞，这些细胞通常处于晚期凋亡或坏死状态。因此，Annexin V阳性/PI阴性的细胞是早期凋亡细胞，而Annexin V阳性/PI阳性的细胞则可(kě)能(néng)是晚期凋亡或坏死细胞。

 

 

 

Caspase 3/7活性测定

Caspase 3/7活性测定专注于检测凋亡过程中(zhōng)的关键执行酶——caspase-3和caspase-7的活性。Caspase酶负责切割多(duō)种底物(wù)，从而导致细胞组分(fēn)的系统性分(fēn)解，包括DNA片段化和核浓缩。


工(gōng)作(zuò)原理(lǐ)：

原理(lǐ)：在凋亡启动时，caspase-3和caspase-7被激活并切割特定的底物(wù)。Caspase 3/7活性测定使用(yòng)一种由这些活跃的caspase酶切割的发光或荧光底物(wù)，释放出与细胞群體(tǐ)中(zhōng)发生的凋亡量成比例的可(kě)检测信号。

执行阶段检测：与检测早期凋亡的Annexin V不同，Caspase 3/7活性测定更专注于凋亡的执行阶段，提供了对凋亡过程后期阶段的检测。

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